外泌體的提純與凍干

外泌體差速超速離心提純方法：

DUC 是最早和最常報(bào)道的外泌體分離策略。操作步驟如下。該方法過程簡(jiǎn)單，不引入其他標(biāo)記，適用于大劑量樣品分析。然而，鑒于細(xì)胞外液具有高度異質(zhì)性，DUC 可導(dǎo)致非理想的外泌體聚集; 因此，它可能不是一種合適的外泌體純化方法，因?yàn)榇笮∠嗨频牟煌遗莺偷鞍踪|(zhì)聚集體可以在 100,000 × g 下共同形成。因此，應(yīng)進(jìn)一步純化使用該方法制備的外泌體。此外，離心力會(huì)導(dǎo)致外泌體結(jié)構(gòu)的破壞，進(jìn)而影響下游實(shí)驗(yàn)，特別是外泌體的功能分析。

外泌體凍干工藝開發(fā)與處方設(shè)計(jì): 

1. 核心目標(biāo)： 保持外泌體完整性（膜結(jié)構(gòu)、RNA/蛋白質(zhì)活性）；提高凍干后復(fù)溶性及長(zhǎng)期穩(wěn)定性。

2. 關(guān)鍵步驟與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)保護(hù)劑篩選：常用海藻糖、蔗糖、甘露醇等非還原性糖類，通過氫鍵穩(wěn)定脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，減少冰晶損傷。 實(shí)驗(yàn)方案：對(duì)比不同保護(hù)劑（如海藻糖濃度梯度）對(duì)外泌體粒徑、Zeta電位、蛋白質(zhì)含量的影響。 

凍干曲線優(yōu)化： 分析指標(biāo)：水分殘留量（<3%）、復(fù)溶時(shí)間（<1分鐘）、形態(tài)（納米流式檢測(cè)，需要由用戶完成）。 

外泌體凍干可提供如下服務(wù)：

1.  提供外泌體凍干配方開發(fā)。

2.  提供外泌體凍干工藝曲線開發(fā)。

3.  提供外泌體凍干生產(chǎn)放大工藝開發(fā)。

4.  提供外泌體上下游凍干設(shè)備開發(fā)。